Roche LightCycler? 480 II实时荧光定量PCR系统

发布日期:2023-01-28     点击数:

一、主要应用:

Roche LightCycler480 II可进行绝对定量、相对定量、基因分型(熔解曲线法及终点法)、高分辨率融解曲线分析,同时适用几乎所有检测模式(染料检测、水解探针(TaqMan探针)、杂交探针、简单探针等);采用Therma-BaseTM热循环专利技术和先进的光学检测系统,彻底消除边缘效应,保持稳定优异的检测结果;可同时检测96孔板样品,结果通过PCR循环过程中实时荧光采集和软件分析进行定量和基因型的分析。出色的光学检测系统可以进行多重PCR检测,并适用于多种检测模式,包括:

1、非序列依赖的探针模式(SYBR Green I或其他饱和荧光染料);

2、序列特异的探针模式(Taqman水解探针模式,杂交探针模式,简单探针模式,分子信标,Scorpions等模式);

3、通过高分辨率熔解曲线分析(HRM)进行基因扫描突变检测,产物分型和SNP研究等。

二、使用流程

1、打开LightCycler480总电源,系统进入自检,自检过程中切勿放置反应板,自检完毕后左侧指示灯为绿色,右侧指示灯为橙色。

2、按多孔板加载器按钮,放置反应板,此时两个指示灯均显示绿色。

3、开启计算机电源,双击“LightCycler480 Software”图标,成功登陆后点击“New Experiment”按钮,进入“New Experiment/Run Protocol”程序设置界面。

4、设置实验程序,依次为:按“Program Name”命名程序,按“Cycles”设置循环数,按“Analysis Mode”选择分析模式;在“Temperature Targets”界面设置所指定程序的内容,在“Target(℃)”处填写目标温度;按“Acquisition Mode”选择信号采集方式,按“Hold”设定持续时间,按“Ramp Rate(℃/s)”设置升降温速率。若需增添步骤,可点击“+”,点击上下箭头调整各程序顺序。

5、设置完毕后,单击“Start Run”,在跳出的对话框中命名并保存。点击“确认”,此时LightCycler480仪器上的两个指示灯均为绿色闪动状态。

6、实验运行完毕后,点击界面左侧的“Analysis”按钮分析数据,“Create new analysis”窗口显示分析方法,“Open existing analysis”窗口显示已分析结果。点击“Calculate”生成结果,点击右侧的保存。

7、点击左侧工具栏中“Report”,在“General”和“Detailed”两栏中选择实验报告所要包含的内容;点击右上方“PDF”按钮将报告保存为*.pdf文件。

8、仪器使用完毕后,取出反应板,关闭LightCycler480仪器电源,退出LightCycler480应用软件。

注意事项:

1、仪器自检过程切勿放入反应板;若自检未通过,导致多孔板加载器故障不能收回,请及时联系工作人员,切勿私自处理。

2、必须使用仪器配套的96孔PCR板。

3、仪器电脑开启需密码权限,请于工作日(8:00-17:30)预约使用。

3、参数设置注意检查再运行,特别是“Acquisition Mode”选择信号采集方式一定要记得选择。

4、严禁在存放本机的实验室内揭开使用后的PCR板贴膜。

5、实验若需提前终止,请点击“End Program”键。

6、拷贝数据,需提前将U盘格式化后再使用。

7、仪器出现任何故障,及时联系工作人员。


上一条:冷冻组织研磨仪

下一条:流式细胞仪